实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200pg/mL
灵敏度:1.78pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清 和 其他生物液体
| 别称
E-CSF; ESGF; EDF; TRF; Colony-Stimulating Factor,Eosinophil; T-Cell replacing Factor; B Cell Differentiation Factor I; Eosinophil Differentiation Factor
| IL-5 简介
白细胞介素5(IL-5)是一种多效性细胞因子,主要由T细胞生产,在小鼠中由Th 2亚群细胞产生,在人类中IL-5则主要由活化T细胞产生。小鼠IL-5 由133氨基酸残基组成,含21氨基酸的信号肽,成熟IL-5分子含有112氨基酸残基,裸肽分子量12-15kDa,有3个糖基化位点,糖基化后分子量为18kDa,糖基化对于IL-5活性表达以及与相应受体的结合起重要作用。小鼠IL-5通常以二硫键连接的二聚体形式存在,分子量为45 kDa。人和小鼠IL-5基因分别定位于第5号和第11号染色体,与IL-3、IL-4、GM-CSF等造血因子的基因密切连锁。人和鼠IL-5在氨基酸水平上有70%的同源性,生物学作用有交叉反应;人和鼠IL-5Rα链有79%的同源性。小鼠IL-5促进抗原刺激的B细胞分化为抗体产生细胞,主要作用于进入细胞增殖后期的B细胞,并增加活化B细胞IL-2R的表达,IL-5的这种刺激作用与IL-6功能相似。人IL-5对B细胞似无刺激作用。小鼠IL-5可促进IgA合成,其机制可能是:(1)使 mIgM阳性B细胞分化为mIgA阳性B细胞;(2)促进IgA 型B细胞的增殖和分化,成为分泌IgA的浆细胞。IL-4有协同IL-5促进IgA 合成的作用。IL-5对IgM的分泌也有促进作用。
| 特异性
可检测样本中小鼠的IL-5,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(pg/mL) | 200 | 100 | 50 | 25 | 12.5 | 6.25 | 3.12 | 0 |
OD值 | 2.15 | 1.37 | 1.21 | 0.85 | 0.52 | 0.34 | 0.21 | 0.12 |
校正OD值 | 2.03 | 1.57 | 1.02 | 0.73 | 0.4 | 0.22 | 0.13 | - |
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康小鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的小鼠IL-5,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
血清(n=8) | 84-101 | 96 |
血浆(n=8) | 92-105 | 102 |
细胞培养上清(n=8) | 96-108 | 105 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康小鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度小鼠IL-5,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 血清 | 血浆 | 细胞培养上清 |
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-96 | 90-110 |
平均回收率(%) | 91 | 93 | 96 | |
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 | 105-115 |
平均回收率(%) | 94 | 98 | 108 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。