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Derf联合SEB诱导特应性皮炎模型

背景
1、模型的定义:特应性皮炎 (Atopic Dermatitis, AD) 是一种慢性或慢性复发性瘙痒性炎症性皮肤病,这种由T细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞及其他细胞感染的皮肤病变关联,暗示其潜在的复杂免疫功能障碍有关。屋尘螨蛋白Derf和葡萄球菌类毒素SEB反复作用于皮肤,诱导AD样皮肤病变。屋尘螨衍生的丝氨酸蛋白酶对角质形成细胞的PAR-2的激活诱导产生ET-1(是由各种类型的细胞包括内皮细胞,血管平滑肌细胞,角质形成细胞和炎性细胞合成的多肽),有助于诱导特应性皮炎中瘙痒的产生; SEB则可在皮肤上引起炎症反应,达到维持和加剧皮肤炎症的目的。 2、模型应用方向:皮肤科相关课题。 3、实验动物(品系、周龄、性别):小鼠品系: C57BL/6、BALB、cNC/Nga;周龄:6-8周;性别不限。 4、造模方法简介:麻醉后,背部涂抹脱毛膏,刮去脱毛膏及毛发,形成3cm²左右脱毛区域,并在除毛后的皮肤上轻刮造成皮损。生理盐水清洗背部并消毒。将Derf及SEB滴于化妆棉上,用胶布将化妆棉固定于小鼠脱毛区域,并使用胶布将其缠在小鼠腰腹位置。第4天,将敷药装置解除,休息1-2天后再重复给药一次;第9天,解除第二次给药的装置。前两次给药为第一轮给药,第9天后再进行第二轮共两次给药。步骤同前。于第一次给药后24天进行观察及评分。 5、模型验证:第24天进行评分,对背部造模区域的四个参数:发红,出血,喷发和脱屑进行评价,评级按以下严重性等级: 0-无症状, 1-轻度, 2-中级, 3-严重。 6、参考文献:Huang Ke, et al. Glucocorticoid insensitivity by staphylococcal enterotoxin B n keratinocytes of allergic dermatitis is associated with impaired nuclear translocation of the Glucocorticoi id Receptor a.[J] J Dermatol Sci, 2018, 92: 272-280. (1F=3.687) 7、其他验证:如离体皮肤HE染色病理学检测等。
材料和方法
C57BL/6 小鼠(雌雄各半,6-8周龄左右)
造模方法:将带有Derf和SEB的化妆棉固定在背部脱毛区,几天后解除并休息一段时间。反复3轮后成功制备特应性皮炎模型。
阳性药物:不注明
评价指标:表观评分、ELISA检测、HE染色、甲苯胺蓝染色
验证

造模示意图


表观评分


ELISA检测


皮肤组织HE染色


皮肤组织甲苯胺蓝染色